Anticorpi antinucleari (ANA)

Gli anticorpi antinucleari fanno parte del complesso processo diagnostico delle malattie sistemiche del tessuto connettivo. Il complesso meccanismo di formazione degli anticorpi antinucleari rende difficile l'interpretazione dei risultati e la presenza o l'assenza di un particolare anticorpo non sempre indica un processo patologico. Quali sono i tipi di anticorpi antinucleari? Quando dovrebbe essere eseguito il test?

Sommario:

1. Anticorpi antinucleari - tipi
2. Anticorpi antinucleari: formazione e meccanismo d'azione
3. Anticorpi antinucleari - indicazioni per lo studio
4. Anticorpi antinucleari: qual è il test?
5. Anticorpi antinucleari: come interpretare il risultato?

Gli anticorpi antinucleari (ANA) sono autoanticorpi diretti contro gli elementi del nucleo cellulare, ad esempio DNA e citoplasma. Sono uno degli anticorpi più diversi e più studiati.

Anticorpi antinucleari - tipi

• anticorpi contro antigeni nucleari estraibili (anti-ENA):
• contro la DNA topoisomerasi I (anti-Scl70)
• contro ribonucleoproteina (anti-RNP)
• contro l'antigene Smith (anti-Sm)
• anti-Mi2 / Mi-2
• anti-Ro (SS-A)
• anti-La
• anti-Jo1
• anti-PM-Scl
• anti-Kn
• anticorpi contro la proteina nucleare che forma i pori gp-2010 (anti-gp-210)
• anticorpi contro DNA a doppia elica nativo (anti-dsDNA)
• anticorpi anti-centromerici (anti-ACA)

Anticorpi antinucleari: formazione e meccanismo d'azione

L'autoimmunità è una risposta anormale del sistema immunitario contro i suoi stessi tessuti, con conseguente comparsa di malattie autoimmuni.

Sono stati descritti vari meccanismi di autoimmunità, uno dei quali è il rilascio di antigeni nascosti dal sistema immunitario, ad esempio come risultato di danni ai tessuti infiammatori.

Quindi vengono rilasciati gli elementi trovati nel nucleo cellulare, ad esempio DNA, RNA, istoni, che il sistema immunitario inizia a riconoscere come qualcosa di estraneo e produce anticorpi anti-nucleari contro di essi.

Anticorpi antinucleari - indicazioni per lo studio

• sospetto di malattie del tessuto connettivo:
• lupus eritematoso sistemico (presenza di anticorpi nel 95-100% dei pazienti; gli anticorpi anti-dsDNA sono un marker specifico della malattia)
• lupus indotto da farmaci (95-100% dei pazienti)
• sindrome da antifosfolipidi (40-50% dei pazienti)
• sclerodermia sistemica (80-95% dei pazienti, in particolare anticorpi anti-Scl70)
• polimiosite e dermatomiosite (40-80% dei pazienti, in particolare anticorpi anti-Jo1 e anti-Mi2)
• Sindrome di Sjögren (48-96% dei pazienti, in particolare anticorpi anti-Ro e anti-La)
• artrite reumatoide (circa il 10% dei pazienti)
• artrite idiopatica giovanile (meno del 10% dei pazienti)
• Sindrome di Raynaud (20-60% dei pazienti)
• fibromialgia (15-25% dei pazienti)
• malattie miste del tessuto connettivo (95-100% dei pazienti)
• valutazione dell'attività della malattia e monitoraggio dell'efficacia del trattamento, ad esempio anticorpi anti-dsDNA nel lupus eritematoso sistemico
• correlare la presenza di anticorpi con l'insorgenza di sintomi specifici della malattia, ad esempio la sindrome di Sjögren e la presenza di anticorpi anti-Ro e anti-La
• prevedere la malattia in futuro

Anticorpi antinucleari: qual è il test?

Per la determinazione degli anticorpi antinucleari, il sangue prelevato dalla flessione del gomito viene digiunato.

I metodi utilizzati per determinare gli anticorpi sono molto diversi e dipendono dal tipo di anticorpo antinucleare misurato. Questi sono principalmente metodi immunologici come:

• ELISA
• RIA
• immunofluorescenza indiretta
• metodo di doppia immunodiffusione
• macchia occidentale

Nel caso degli anticorpi antinucleari, viene utilizzata una diagnosi in due fasi. Innanzitutto, viene eseguito un test di screening utilizzando il metodo di immunofluorescenza indiretta, caratterizzato da un'elevata sensibilità.

Il metodo di immunofluorescenza indiretta consiste nell'immobilizzare cellule HEp-2 derivate da cellule epiteliali umane su un vetrino da microscopio.

Le cellule di questa linea hanno nel loro citoplasma e antigeni del nucleo cellulare che legano gli anticorpi patologici dal sangue del paziente.

Dopo aver aggiunto il siero del paziente al bicchiere, gli anticorpi antinucleari si legano ad antigeni specifici e sono visibili al microscopio grazie a speciali marker fluorescenti.

Il vantaggio dell'immunofluorescenza indiretta è la possibilità di differenziare i tipi di anticorpi in base al tipo di illuminazione del colorante fluorescente.

Ad esempio, l'ardore del nucleo di tipo omogeneo indica la presenza di anticorpi anti-dsDNA o anti-ssDNA.

Un risultato positivo del test di screening deve essere sempre confermato. A tale scopo vengono utilizzati metodi immunologici molto specifici, ad esempio western blot. Dopo aver rilevato la presenza e l'identificazione del tipo di anticorpo antinucleare, viene determinato il suo titolo, cioè la massima diluizione di siero alla quale è possibile rilevare la presenza di anticorpi.

Anticorpi antinucleari: come interpretare il risultato?

Il titolo corretto degli anticorpi antinucleari dovrebbe essere inferiore a 1:40.

Se il test di screening per gli anticorpi antinucleari è negativo e non ci sono sintomi clinici che suggeriscano una malattia sistemica del tessuto connettivo, la diagnosi non deve essere estesa per includere anticorpi specifici, ad esempio anti-dsDNA, anti-Sm.

I titoli clinicamente rilevanti sono considerati ≥ 1: 160 negli adulti e ≥ 1:40 nei bambini.

In caso di risultati positivi, si propone di interpretare il risultato del test come segue:

• titolo 1: 40-1: 80 - risultato borderline (debolmente positivo), in assenza di sintomi clinici di malattie del tessuto connettivo, non è consigliabile ripetere il test o eseguire un test di follow-up, perché i risultati nella maggior parte delle persone non cambiano nel corso degli anni
• titolo 1: 160-1: 640 - risultato medio positivo, in assenza di sintomi clinici di malattie del tessuto connettivo, si consiglia di ripetere il test dopo 6 mesi
• titolo ≥ 1: 1280 - risultato positivo alto, in presenza di sintomi clinici di malattie del tessuto connettivo, è necessaria un'ulteriore diagnosi specialistica per diagnosticare la malattia

Va tenuto presente che i test sierologici per gli anticorpi antinucleari fanno parte di un processo diagnostico complesso e un risultato positivo deve sempre essere interpretato nel contesto del quadro clinico e della presenza dei sintomi caratteristici della malattia.

Gli anticorpi antinucleari a basso titolo sono presenti nel 5% della popolazione sana e la loro frequenza aumenta con l'età.

Inoltre, la loro presenza si trova in condizioni fisiologiche e fisiopatologiche in cui gli anticorpi antinucleari non hanno significato diagnostico:

• infezioni, ad esempio tubercolosi, sifilide, malaria
• malattia del fegato, ad esempio cirrosi epatica
• malattie polmonari, ad esempio sarcoidosi, asbestosi
• tumori, ad esempio leucemia, linfoma, cancro al seno, melanoma
• malattie della pelle, ad esempio psoriasi, lichen planus
• dopo trapianto di organi, ad es. trapianto di cuore, trapianto di rene
• uso di droghe, ad esempio farmaci antiepilettici, idralazina, sali di litio,
• altre malattie autoimmuni, ad es. morbo di Hashimoto, morbo di Addison, diabete di tipo I.
• gravidanza (fino al 20% delle donne in gravidanza)

Vale la pena saperlo...

La variazione etnica caratterizza l'emergere di diversi tipi di anticorpi antinucleari.

Ad esempio, i pazienti caucasici con sclerosi sistemica hanno maggiori probabilità di avere anticorpi anti-ACA e gli afroamericani e gli africani hanno maggiori probabilità di avere anticorpi reattivi alla topoisomerasi.

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Test diagnostico ANA (anticorpo antinucleare)

Letteratura

1. Fischer K. et al ... Autoanticorpi nella pratica reumatologica. Forum Reumatol. 2016, 2, 1, 39–50.
2. Malattie interne, a cura di Szczeklik A., Medycyna Praktyczna Kraków 2010
3. Diagnostica di laboratorio con elementi di biochimica clinica. Manuale per studenti di medicina a cura di Dembińska-Kieć A. e Naskalski J.W., Elsevier Urban & Partner Wydawnictwo Wrocław 2009, 3a edizione

Circa l'autore

Karolina Karabin, MD, PhD, biologa molecolare, diagnostica di laboratorio, Cambridge Diagnostics Polska Biologa specializzata in microbiologia e diagnostica di laboratorio con oltre 10 anni di esperienza nel lavoro di laboratorio. Laureato alla Facoltà di Medicina Molecolare e membro della Società Polacca di Genetica Umana, Responsabile di assegni di ricerca presso il Laboratorio di Diagnostica Molecolare presso il Dipartimento di Ematologia, Oncologia e Malattie Interne dell'Università di Medicina di Varsavia. Ha difeso il titolo di dottore in scienze mediche nel campo della biologia medica presso la 1a Facoltà di Medicina dell'Università di Medicina di Varsavia. Autore di numerosi lavori scientifici e divulgativi nel campo della diagnostica di laboratorio, della biologia molecolare e della nutrizione. Quotidianamente, come specialista nel campo della diagnostica di laboratorio, dirige il dipartimento di convalida della Cambridge Diagnostics Polska e collabora con un team di nutrizionisti presso la CD Dietary Clinic. Condivide le sue conoscenze pratiche sulla diagnostica e sulla terapia dietetica delle malattie con specialisti in convegni, sessioni di formazione, riviste e siti web. È particolarmente interessata all'influenza dello stile di vita moderno sui processi molecolari nel corpo.

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