Cultura (test microbiologico): che cos'è? Indicazioni per la cultura

La cultura è un test microbiologico che mira a rilevare e identificare i microrganismi nel sangue, nelle urine, nelle feci o in altro materiale biologico. L'inoculazione è un processo in più fasi e viene eseguita solo in casi giustificati. Controlla quali sono le indicazioni per la cultura e di cosa si tratta.

La coltura è un test microbiologico eseguito per rilevare e identificare i patogeni in campioni di materiale biologico.

A causa del tipo di patogeni testati, si distinguono la cultura batteriologica (test batteriologico) e la cultura micologica (test micologico).

A causa del tipo di materiale biologico, ci sono colture di sangue, urina, feci, sperma, espettorato o perdite vaginali. Il materiale biologico può anche essere liquido cerebrospinale, tamponi dalla gola, dall'orecchio, dal naso, dalla mucosa orale e persino dalle sacche congiuntivali degli occhi, da pustole e altre lesioni cutanee, nonché da ferite, fistole o ascessi, ecc.

Cultura - indicazioni per l'esame

La coltura viene eseguita quando si sospetta un'infezione, cioè quando il paziente sviluppa sintomi. Ad esempio, l'indicazione per l'urinocoltura saranno i sintomi di un'infezione del tratto urinario, come la lombalgia o la minzione frequente e dolorosa. D'altra parte, si può sospettare un'intossicazione del sangue quando si sviluppano febbre e brividi, respiro accelerato e battito cardiaco, calo della pressione sanguigna, alterazione della coscienza o oliguria. Al contrario, la coltura delle feci viene eseguita su un paziente che ha diarrea, crampi addominali e / o sangue o muco nelle feci.

La coltura delle urine e delle perdite vaginali dovrebbe essere eseguita nelle donne in gravidanza - anche in assenza di sintomi di infezione - per escludere la presenza di microrganismi che possono rappresentare una minaccia per il bambino.

Cultura - raccolta di materiale biologico

In primo luogo, un campione di materiale biologico dovrebbe essere adeguatamente raccolto. In caso di emocoltura, almeno due campioni di sangue devono essere prelevati da due vene diverse, in due provette contenenti due tipi di terreno di coltura (consentendo la rilevazione di batteri sia aerobi che anaerobi). A sua volta, il materiale biologico dalla vagina viene prelevato con uno speciale tampone: un tampone viene prelevato dal vestibolo vaginale e l'altro dall'area dell'ano. Quindi, i tamponi vengono anche posti su un substrato speciale (il cosiddetto substrato di trasporto). L'urinocoltura viene invece effettuata sul primo campione, l'urina dopo la notte (quindi il numero di batteri è il più alto), che viene raccolto in un contenitore sterile utilizzando il cosiddetto flusso medio.

Importante

Prima di prendere la coltura, informi il medico di tutti i farmaci che sta assumendo (in particolare antibiotici e farmaci che influenzano la coagulazione del sangue), condizioni mediche e possibili portatori di agenti patogeni trasmessi dal sangue (ad esempio HBV, HCV, HIV).

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Cultura: qual è il test?

FASE 1 - SEMINA

Il primo passo è la semina del materiale biologico, ovvero l'applicazione di un campione del materiale al cosiddetto terreno di coltura (microbiologico). È una miscela di nutrienti accuratamente selezionati che consentono ai microrganismi di crescere e moltiplicarsi. I terreni di coltura arricchiti di sangue sono i più utilizzati in quanto forniscono condizioni ottimali per la crescita della maggior parte delle specie di patogeni.

L'inoculazione può essere eseguita in diversi modi: su un mezzo liquido, su un'inclinazione di agar, ma il più delle volte viene eseguita su piastre di Petri (è un recipiente da laboratorio, un supporto cilindrico con un fondo largo e piatto), cioè un po 'del materiale testato viene steso a zigzag o radialmente su tutta la superficie substrati, oppure sono suddivisi in settori e in essi viene distribuito il materiale.

Di solito, l'inoculazione viene eseguita sotto una cellula laminare che consente una condizione sterile. La camera impedisce ai batteri o alle spore fungine, che fluttuano costantemente nell'aria all'esterno della camera, di entrare nella camera.

È il caso, ad esempio, dell'urinocoltura. Nel caso dell'emocoltura, questo passaggio viene omesso perché il mezzo viene messo in flaconi sterili o provette in cui viene prelevato direttamente il sangue. Lo stesso vale per i tamponi, che vengono posti su un terreno speciale immediatamente dopo la raccolta e immediatamente destinati alla riproduzione.

FASE 2 - ALLEVAMENTO

Dopo che il campione è stato applicato al substrato, viene posto in un incubatore, dove la temperatura corrisponde a quella del corpo umano. Queste sono le condizioni che portano alla moltiplicazione dei microrganismi. La stimolazione della crescita dei microrganismi desiderati può anche essere ottenuta selezionando il pH e l'ossigenazione appropriati. La coltivazione di agenti patogeni dura da 24-48 ore (alcune specie di batteri) a diverse decine di giorni (alcuni funghi).

FASE 3 - ISOLAMENTO

Lo scopo di questa fase è isolare una specifica specie di patogeno. In caso di isolamento di microrganismi, viene realizzata una sospensione batterica di densità specifica, che verrà utilizzata per identificare e determinare la suscettibilità al farmaco del ceppo.

FASE 4 - IDENTIFICAZIONE

Attualmente vengono utilizzati test biochimici, manuali o automatici per identificare i microrganismi. Un esempio di test biochimico è il test API. Consiste nell'introdurre la sospensione batterica in ciascuno dei microtubi inclusi nel set. La fase successiva è la coltivazione di microrganismi alla giusta temperatura. Le reazioni biochimiche che si verificano durante questo periodo causeranno cambiamenti di colore, spontaneamente o dopo l'aggiunta del reagente indicatore. Per la lettura viene utilizzato un libro di codici o uno speciale programma per computer.

La diagnostica microbiologica è completata da una preparazione microscopica che consente l'osservazione delle cellule patogene dopo la loro precedente colorazione.

FASE 5 - ANTIBIOGRAMMA

Al termine dell'inoculazione, viene eseguito un antibiogramma per valutare la suscettibilità del patogeno al farmaco. Il microbiologo posiziona i dischi con concentrazioni specifiche di antibiotici su un terreno appropriato con la sospensione batterica (il cosiddetto antibiogramma). Le letture dell'antibiogramma vengono effettuate misurando la dimensione delle zone di inibizione della crescita attorno ai dischi antibiotici.

Sulla base dei risultati dell'esame microbiologico e dell'antibiogramma, il medico decide il trattamento appropriato.