Test di trasformazione dei linfociti (LTT)

Il test di trasformazione dei linfociti (LTT) è stato sviluppato negli anni '60 ed è utilizzato principalmente nella diagnostica allergologica. Il test LTT è stato utilizzato anche nella diagnosi delle infezioni croniche da Borrelia burgdorferi, che sono la causa della malattia di Lyme. Il test è particolarmente importante quando ci sono difficoltà nella diagnosi della malattia. Cos'è il test LTT e come interpretarne i risultati?

Sommario:

1. Applicazione del test di trasformazione dei linfociti (LTT)
2. Test di trasformazione dei linfociti (LTT) - Borreliosi di Lyme
3. Test di trasformazione dei linfociti (LTT): che cos'è?
4. Test di trasformazione dei linfociti (LTT) - risultati

Il test di trasformazione dei linfociti (LTT) è stato descritto per la prima volta nel 1960.

Il test è attualmente utilizzato nella ricerca e come strumento diagnostico in vari campi della medicina, principalmente allergologia.

Applicazione del test di trasformazione dei linfociti (LTT)

Il test LTT è stato utilizzato in:

• la valutazione dei difetti del sistema immunitario, ad esempio manifestati da una maggiore suscettibilità alle infezioni
• diagnostica di infezioni batteriche croniche (Borrelia, Chlamydia, Yersinia), protozoi (Giardia lamblia) e virali (virus dell'herpes)
• diagnostica dell'ipersensibilità (allergia) di tipo IV dipendente dai linfociti T a farmaci, metalli, additivi alimentari, muffe, alimenti (es. glutine); Il test LTT è stato particolarmente utilizzato nella rilevazione di allergie ai materiali dentali come protesi e otturazioni

Test di trasformazione dei linfociti (LTT) - Borreliosi di Lyme

Le difficoltà diagnostiche legate alla diagnosi di borreliosi di Lyme costringono gli specialisti a cercare test di laboratorio diversi da quelli raccomandati. Uno di questi è il test LTT. Si ritiene che il test LTT possa essere utile in:

• conferma di infezione attiva in persone con risultati positivi ai test sierologici, ma senza sintomi indicativi della malattia di Lyme
• conferma di infezione attiva in soggetti con test sierologici negativi o borderline, ma con sintomi clinici della malattia di Lyme
• monitoraggio dell'efficacia della terapia antibiotica
• valutazione della recidiva della borreliosi di Lyme

Tuttavia, va tenuto presente che il test LTT non è un test raccomandato nella diagnosi della malattia di Lyme dalla Camera Nazionale dei Diagnostici di Laboratorio, dall'Istituto Nazionale di Sanità Pubblica e dal Consulente Nazionale nel campo delle malattie infettive, perché questo test richiede ancora una convalida (cioè conferma della sua credibilità) in questo caso. l'entità della malattia.

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Test di trasformazione dei linfociti (LTT): che cos'è?

Il test consiste nel valutare la reattività delle cellule del sistema immunitario (cellule T della memoria immunitaria) all'antigene / allergene testato, ad esempio un farmaco, una proteina batterica. Le cellule immunitarie diventano reattive a un dato antigene / allergene dopo un precedente contatto con esso (da qui il termine cellule T della memoria immunitaria).

Per eseguire il test LTT, le cellule vengono ottenute dal sangue periferico del paziente prelevato da una vena. Quindi, in laboratorio, le singole frazioni di cellule vengono separate dal sangue, cioè le cellule mononucleate (linfociti e monociti).

Le cellule isolate vengono quindi coltivate in condizioni appropriate e quindi stimolate con l'antigene / allergene specifico. Se le cellule sono state in contatto con esso, iniziano a dividersi e quindi viene misurata l'intensità di queste divisioni.

Le singole modifiche al test LTT misurano l'endpoint della divisione cellulare in modo diverso e possono essere valutate indirettamente misurando:

• la produzione di molecole di segnalazione come l'interferone-gamma (INF-γ) che vengono prodotte dalla divisione delle cellule; un altro nome per questa modifica del test LTT è EliSpot
• attività del recettore sulla superficie delle cellule in divisione, ad esempio CD25, CD69, HLA-DR
• la quantità di DNA formatasi durante la fase di sintesi che si trova solo nei linfociti T stimolati da antigeni / allergeni; a tale scopo, i filamenti di DNA appena sintetizzati vengono etichettati ad esempio con 3H-timidina, che viene poi rilevata da un contatore speciale

Il test viene eseguito in tre o quattro ripetizioni per aumentare l'affidabilità del risultato ottenuto.

Vale la pena saperlo

Il test LTT è un test di laboratorio molto impegnativo. Richiede attrezzature di laboratorio moderne e costose e l'esperienza del personale che esegue il test.

Per questo motivo, il test deve essere eseguito solo in centri che hanno esperienza nell'esecuzione del test LTT.

Test di trasformazione dei linfociti (LTT) - risultati

Un risultato positivo del test LTT indica la presenza di linfociti T della memoria immunitaria nel sangue che erano stati precedentemente in contatto con l'antigene / allergene testato. Il che può indicare una relazione causale tra il fattore studiato ei sintomi del paziente.

Il risultato del test include valori numerici espressi come indice di stimolazione (SI). SI esprime l'intensità di divisione delle cellule immunitarie rispetto al controllo negativo, che in questo caso sono cellule immunitarie che non sono state stimolate con antigene / allergene.

Un punteggio SI inferiore a 1 è considerato negativo, un punteggio compreso tra 2 e 3 è debolmente positivo (borderline) e un punteggio superiore a 3 è considerato positivo.

Importante

Quali fattori possono influenzare il risultato LTT?

L'assunzione di farmaci che sopprimono l'attività del sistema immunitario, ad esempio steroidi (metotrexato, prednisone), può ridurre la capacità delle cellule di dividersi nella coltura cellulare e / o la produzione di citochine da parte delle cellule.

Letteratura

1. https://www.xenodiagnostics.com/lymphocyte-transformation-test.html
2. Pichler W.J e Tilch J. Il test di trasformazione dei linfociti nella diagnosi di ipersensibilità ai farmaci. Allergia. 2004 agosto; 59 (8): 809-20.
3. Rychlik U. et al.Diagnostica di laboratorio del test di trasformazione dei linfociti (LTT). Journal of Laboratory Diagnostics 2013, 49 (4); 425-428.
4. Diagnostica di laboratorio delle malattie trasmesse dalle zecche Raccomandazioni del gruppo di lavoro: Camera nazionale dei diagnostici di laboratorio, Istituto nazionale di sanità pubblica-Istituto nazionale di igiene, Consulente nazionale nel campo delle malattie infettive, Dipartimento di malattie infettive e neuroinfezioni, Università di medicina di Białystok, Società polacca di virologia, Varsavia 2014.

Karolina Karabin, MD, PhD, biologa molecolare, diagnostica di laboratorio, Cambridge Diagnostics Polska Biologa specializzata in microbiologia e diagnostica di laboratorio con oltre 10 anni di esperienza nel lavoro di laboratorio. Laureato alla Facoltà di Medicina Molecolare e membro della Società Polacca di Genetica Umana, Responsabile di assegni di ricerca presso il Laboratorio di Diagnostica Molecolare presso il Dipartimento di Ematologia, Oncologia e Malattie Interne dell'Università di Medicina di Varsavia. Ha difeso il titolo di dottore in scienze mediche nel campo della biologia medica presso la 1a Facoltà di Medicina dell'Università di Medicina di Varsavia. Autore di numerosi lavori scientifici e divulgativi nel campo della diagnostica di laboratorio, della biologia molecolare e della nutrizione. Quotidianamente, come specialista nel campo della diagnostica di laboratorio, dirige il dipartimento di convalida della Cambridge Diagnostics Polska e collabora con un team di nutrizionisti presso la CD Dietary Clinic. Condivide le sue conoscenze pratiche sulla diagnostica e sulla terapia dietetica delle malattie con specialisti in convegni, sessioni di formazione, riviste e siti web. È particolarmente interessata all'influenza dello stile di vita moderno sui processi molecolari nel corpo.